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分光光度計對土壤速效磷的測定
點擊次數:1534  發布時間:2016-07-29
分光光度計對土壤速效磷的測定:

磷存在與人體所有細胞中,是維持骨骼和牙齒的必要物質,幾乎參與所有生理上的化學反應。磷還是使心臟有規律地跳動、維持腎臟正常機能和傳達神經刺激的重要物質。

      一、前沿掌握比色法測定土壤速效磷的方法,了解土壤中磷素形態及其土壤供磷能力與土壤速效磷的關系。掌握土壤速效磷的浸提,浸提液的處理,標準曲線制作,顯色,比色,計算。

      二、內容與原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P,A1—P的形態存在,利用氟離子在酸性溶液中絡合Fe3 和Al3 的能力,可使這類土壤中比較活性的磷酸鐵鋁鹽被陸續活化釋放,同時由于H 的作用,也能溶解出部分活性較大的Ca—P,然后用鉬銻抗比色法進行測定。

      三、主要儀器及試劑配制儀器:塑料杯,往復式振蕩機,分光光度計或光電比色計試劑: (1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提劑稱取1.11克NH4F溶于800毫升水中,加1.0molL-1HCl25毫升,然后稀釋至1升,貯于塑料瓶中,其它試劑同前法。

      (2)鉬銻抗試劑 稱取酒石酸銻鉀(KSbOC4H4O6)0.5克,溶于100毫升水中,制成5%的溶液。

      另稱取鉬酸銨20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升濃硫酸,邊加邊攪動,再將0.5%的酒石酸銻鉀溶液100毫升加入到鉬酸銨液中,zui后加至1升,充分搖勻,貯于棕色瓶中,此為鉬銻混合液。

       臨用前(當天)稱取1.5克左旋抗壞血酸溶液于100毫升鉬銻混合液中,混勻。此即鉬銻抗試劑。(有效期24小時,如貯于冰箱中,則有效期較長。)

       (3)磷標準溶液稱取0.439克KH2PO4(105℃烘2小時)溶于200毫升水中,加入5毫升濃H2SO4,轉入1升量瓶中,用水定容,此為100 mgkg-1磷標準液,可較長時間保存。取此溶液稀釋20倍即為5 mgkg-1磷標準液,此液不宜久存。

      四、操作方法與實驗步驟1、稱取通過1毫米篩孔的風干土樣品5克(到0.01克)于150毫升塑料杯中,加入0.03molL-1NH4F—— 0.025 molL-1HCl浸提劑50毫升,在20—30℃條件下振蕩30分鐘,取出后立即用干燥漏斗和無磷濾紙過濾于塑料杯中,同時作試劑空白試驗。

       2、吸取濾液10—20毫升于50毫升容量瓶中,加入10毫升0.8M H3BO3,再加入二硝基酚指示劑2滴,用稀HCl和Na0H液調節pH至待測液呈微黃,用鉬銻抗試劑5毫升顯色,并用蒸餾水定容,搖勻,在室溫高于15℃的條件下放置30分鐘,用紅色濾光片或660nm波長的光進行比色,以空白溶液的透光率為100(即光密度為0),讀出測定液的光密度,在標準曲線上查出顯色液的磷濃度(mgkg-1)。

      3、標準曲線制備:吸取含磷(P)5mgkg-1的標準溶液0、1、2、3、4、5、6毫升,分別加入50毫升容量瓶中,加入10毫升0.8M H3BO3,再加入二硝基酚指示劑2滴,用稀HCl和Na0H液調節pH至待測液呈微黃,再加入鉬銻抗顯色劑5毫升,搖勻,定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mgkg-1磷標準系列溶液,與待測溶液同時比色,讀取吸收值,在方格座標紙上以吸收值為縱座標,磷mgkg-1數為橫座標,繪制成標準曲線。

      五、作業根據以下公式計算土壤中速效磷的含量 顯色液磷mgkg-1數×顯色液體積×分取倍數 土壤中速效磷mgkg-1=—————————————————――――――――————————— 烘干土重(克)

       顯色液磷mgkg-1數:從工作曲線查得顯色液的磷mgkg-1數 顯色液體積:50毫升 浸提液總體積(50毫升)

      分取倍數=————--------————————— 吸取浸出液毫升數六、參考指標 土壤速效磷   mgkg-1等級 <3 很低 3—7 低 7—20 中等 >20 高

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